土霉素/金霉素/四環素殘留量如何檢測
四環素是一種有機化合物,分子式為C22H24N2O8,本身及其鹽類都是黃色或淡黃色的晶體,在干燥狀態下極為穩定,除金霉素外,其他的四環素族的水溶液都相當穩定。四環素族能溶于稀酸、稀堿等,略溶于水和低級醇,但不溶于醚及石油醚。四環素族抗生素主要包括有金霉素、土霉素、四環素。四環素族抗生素有共同的化學結構母體。金霉素和土霉素都是四環素的衍生物,前者是氯四環素(chloretracyelin),后者是氧四環素(oxyeracyein),四環素族均為酸堿兩性化合物。
四環素的最高殘留限量是所有食品動物,肌肉100微克/千克,肝臟300微克/千克,腎臟600微克/千克;牛奶、羊奶100微克/升,禽蛋200微克/千克;魚肉、蝦肉100微克/千克。
深圳艾瑞斯生產的土霉素/金霉素/四環素膠體金快速檢測卡應用了競爭抑制免疫層析的原理,樣品中的四環素在流動的過程中與膠體金標記的特異性四環素單克隆抗體結合,抑制了抗體和NC膜檢測線上的四環素-BSA偶聯物的結合,從而導致檢測線顏色的深淺變化。當樣品中不含有四環素或濃度低于檢測限時,T線顯色強于C線顯色或與C線顯色一致。當樣品中的四環素濃度等于或高于檢測限時,T線顯色明顯弱于C線顯色或T線不顯色。而無論樣品中是否含有四環素質控線C線都會顯色,以示檢測有效。
【樣品處理】
雞魚: 稱取3g±0.05g組織,加入稀釋后的3ml樣本提取液A,振蕩3min,再加入300ul樣本提取液B,振蕩3min,4000rpm離心10min,取上清待檢。
蝦: 稱取3g±0.05g組織,加入稀釋后的3ml樣本提取液A,振蕩3min,再加入240ul樣本提取液B,振蕩3min,4000rpm離心10min,取上清待檢。
【檢測步驟】
1.使用前請先仔細閱讀說明書。使用前將本試紙條和待檢樣品恢復至室溫。
2.取出試劑筒,打開后取出所需數目的微孔和試紙條,并做好標記。請在1h內盡快使用。檢測試劑取出后,請立即蓋好試劑筒蓋子,防止受潮。
3.用微量移液器吸取200µl待檢樣品于微孔中,緩慢多次抽吸直至混合均勻,肉眼觀察無固形物(該步驟很重要)。
4.室溫(20-25℃)孵育5min后,將標記好的試紙條插入微孔中。
5.使試紙條浸在微孔中5min,根據示意圖判讀結果,其他時間判讀無效。
【結果判定】
1、陰性:T線顯色強于C線或與C線顯色無明顯差異,表示樣品中不含四環素或其濃度低于檢測限。
2、陽性:T線顯色明顯弱于C線顯色,或者T線不顯色,表示樣品中四環素濃度等于或高于檢測限。
3、無效:C線與T線均無紅色條帶出現或者C線無紅色條帶出現但T線有紅色條帶出現;說明此試劑卡已失效、過期,或操作不當,需另做一次測試。